看白癜风专业的医院 https://yyk.39.net/bj/zhuanke/89ac7.html王静课题组开发了一种基于液滴数字聚合酶链反应(ddPCR)的生物条形码免疫测定法,用于苹果、黄瓜、卷心菜和梨中的三唑磷、对硫磷和毒死蜱同时定量检测。制备了三种金纳米颗粒(AuNP)探针和磁性纳米颗粒(MNP)探针,通过抗体与同一管中的三种相应农药结合。设计了三组引物、探针、模板和三种抗体,以确保方法的特异性。在最佳条件下,三唑磷、对硫磷和毒死蜱的检测限(以IC10表示)分别为0.22、0.45和4.49ngmL-1。线性范围依次为0.01-20、0.1-和0.1-ngmL–1,相关系数(R2)分别为0.、0.和0.。回收率和相对标准偏差(RSD)在75.5-98.9%和8.3-16.7%的范围内。本研究首次提供了ddPCR用于测定有机磷农药的检测,也为其他小分子的高通量检测奠定了基础。三种农药同时检测的示意图寡核苷酸设计流程图三唑磷(A)、对硫磷(B)和毒死蜱(C)的标准曲线图本研究将ddPCR技术应用于农药多残留检测,是生物条形码免疫分析的延伸,是方法学研究的重要创新。分别制备了对应三唑磷、对硫磷、毒死蜱的三个AuNP探针和MNP探针,三个免疫竞争反应体系在同一孔反应。三组具有合理特异性的引物和探针以及三种特异性抗体确保了多残留免疫测定的低交叉反应性。此外,与基于qPCR的生物条形码免疫分析相比发现,ddPCR联合生物条形码免疫分析在同时检测三种有机磷农药方面具有灵敏度和线性范围优势。这项工作为同时检测更多农药甚至其他小分子化合物提供技术借鉴,具有较好的应用前景。总体而言,生物条形码信号放大技术与ddPCR信号重放大技术相结合,首次为有机磷农药的多重检测提供了新思路,提高了方法的灵敏度和准确性。论文题目:EnhancedBio-BarcodeImmunoassayUsingDropletDigitalPCRforMultiplexDetectionofOrganophosphatePesticides往期回顾
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